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細(xì)胞培養(yǎng)中,需要警惕的關(guān)鍵點(diǎn)

更新時(shí)間:2023-03-12  |  點(diǎn)擊率:507

許多解決重大疾病的研究,都是以細(xì)胞生物學(xué)為基礎(chǔ)的。而細(xì)胞生物學(xué)研究的重要手段之一,就是細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)。可以這樣說(shuō),沒(méi)有細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),就沒(méi)有如今的細(xì)胞生物學(xué)。

細(xì)胞培養(yǎng)指在人工創(chuàng)造的與體內(nèi)環(huán)境相似的體外條件下,比如適宜的溫度、pH,以及一定的營(yíng)養(yǎng)成分,使細(xì)胞生長(zhǎng)、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種技術(shù)。不同細(xì)胞在進(jìn)行體外培養(yǎng)時(shí),在操作上會(huì)有些許不同,需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型與實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,摸索合適的培養(yǎng)條件。

但原則上講,需要注意以下幾個(gè)關(guān)鍵點(diǎn):

一、嚴(yán)格的無(wú)菌環(huán)境

實(shí)驗(yàn)環(huán)境的污染是細(xì)胞培養(yǎng)的大忌。細(xì)菌、真菌、支原體等微生物的污染,都會(huì)造成細(xì)胞出現(xiàn)凋亡、裂解等狀況,進(jìn)而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此,要定期對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境進(jìn)行清潔消毒??梢杂孟疽后w對(duì)實(shí)驗(yàn)室的墻壁、地面以及桌椅板凳進(jìn)行噴灑和擦拭,一定時(shí)長(zhǎng)的紫外線(xiàn)照射,都有不錯(cuò)的效果。

選擇污染清除試劑,如德國(guó)MB公司的Mycoplasma-off,對(duì)實(shí)驗(yàn)臺(tái)面實(shí)驗(yàn)儀器等進(jìn)行噴灑和擦拭,有效預(yù)防各類(lèi)污染。


對(duì)于培養(yǎng)箱水槽、恒溫水浴鍋,這類(lèi)衛(wèi)生死角,可定期更換無(wú)菌水,并在水中添加德國(guó)MB公司的Water Shield,也能起到預(yù)防作用。



二、選擇優(yōu)質(zhì)的培養(yǎng)試劑

細(xì)胞用的培養(yǎng)試劑多選用分析級(jí)別的試劑。其中,胎牛血清的選擇很重要。劣質(zhì)的胎牛血清不但有污染細(xì)胞的風(fēng)險(xiǎn),而且還會(huì)因?yàn)闋I(yíng)養(yǎng)成分的缺乏,改變細(xì)胞狀態(tài),影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

優(yōu)質(zhì)的胎牛血清,采自5-8月齡牛胚胎,富含各類(lèi)細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖所需的營(yíng)養(yǎng)成分,在出廠(chǎng)前均應(yīng)通過(guò)質(zhì)量檢測(cè),出具《檢測(cè)報(bào)告》。

締一生物的Ausbian進(jìn)口胎牛血清,選擇內(nèi)毒素更低的批次,內(nèi)毒素≤3EU/ml,降低內(nèi)毒素對(duì)細(xì)胞的影響,運(yùn)輸全程冷鏈,避免反復(fù)凍融,每批次附有檢測(cè)報(bào)告。



三、正確的實(shí)驗(yàn)操作

在進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn)時(shí),要嚴(yán)格按照操作流程進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。注意實(shí)驗(yàn)儀器的規(guī)范用法與無(wú)菌操作,避免因?qū)嶒?yàn)操作而帶來(lái)的額外污染。

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