精品国品一二三产品区别在线观看,三人性FREE欧美,亚洲精品国产精品乱码不卡√,精品久久久久久成人av

當(dāng)前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  貼壁細(xì)胞怎么高效傳代?

貼壁細(xì)胞怎么高效傳代?

更新時間:2023-01-30  |  點擊率:694

貼壁生長的細(xì)胞,在培養(yǎng)瓶或者培養(yǎng)皿長至單層鋪滿的狀態(tài)后后,空間已基本上飽和,細(xì)胞生長、增殖受阻,為使其繼續(xù)擴(kuò)增或生長,需要進(jìn)行傳代(再培養(yǎng))處理。同時,傳代培養(yǎng)也可用于細(xì)胞種的保存。不僅如此,各種細(xì)胞實驗也是以高效的細(xì)胞傳代為基礎(chǔ)的。

懸浮型細(xì)胞直接分瓶就可以,而貼壁細(xì)胞則需經(jīng)消化等處理后才能分瓶。一般使用胰蛋白酶,將貼壁細(xì)胞消化成成單個細(xì)胞,也可加入EDTA提高消化能力(EDTA 是一種二價離子的螯合劑,能抑制細(xì)胞膜上的Ca2+和Mg2+)。常用的細(xì)胞消化液一般含有0.25%(w/v)的胰酶和0.03% (w/v) EDTA。

實驗時,先用吸去細(xì)胞培養(yǎng)上清,用PBS清洗細(xì)胞,棄掉洗滌液,重新加入少量的胰酶-EDTA 消化液(根據(jù)培養(yǎng)皿的大小不同,一般2-5ml消化液即可,以剛好鋪滿整個皿底為原則),觀察細(xì)胞直到細(xì)胞變圓脫離瓶壁,此過程一般需要3-5分鐘,為了避免細(xì)胞成團(tuán),消化細(xì)胞的過程中不要拍打細(xì)胞瓶。對于特別難消化的細(xì)胞,可以加入胰酶EDTA 消化液后把細(xì)胞置于37°C 促進(jìn)消化,細(xì)胞脫離瓶壁后,立刻加入含有血清的培養(yǎng)基中止消化。

800-1000rpm,離心5分鐘,然后棄去中止用的培養(yǎng)基,加入適合的新的培養(yǎng)基輕輕混勻細(xì)胞,移入到新的培養(yǎng)瓶。傳代的比例視細(xì)胞類型而定。胰蛋白酶會對某些細(xì)胞的細(xì)胞膜產(chǎn)生損傷,對于這種類型的細(xì)胞,可用細(xì)胞刮輕輕刮下細(xì)胞,加入適量的培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻細(xì)胞,然后進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

優(yōu)質(zhì)的胎牛血清可以提高細(xì)胞的活力,北京締一生物公司的Ausbian特級胎牛血清,幫您把血清問題全部考慮到,并做到血清從出廠,到實驗室,全程低溫冷鏈保護(hù),確保血清無反復(fù)凍融。每個批次產(chǎn)量800-2000升,試用滿意的實驗室批號優(yōu)先鎖定,保證大多數(shù)項目兩年不需換批次,細(xì)胞試驗數(shù)據(jù)穩(wěn)定。


国产在线精品一区二区三区不卡| 精品国产一区二区三区不卡| 囯产精品一品二区三区| 麻豆AV无码精品一区二区| 精品一二三区久久aaa片| 亚洲精品无码成人| 久久久www成人免费毛片| 国产韩国日本欧美品牌suv| 国产午夜福利在线观看| 精品国产一区二区三区av 性色| 久久久久亚洲av综合波多野结衣| 中文字幕mv在线观看| 一个人看的日本hd免费| 97久久国产亚洲精品超碰热 | 日日碰狠狠躁久久躁综合网| 少妇高潮a片无套内谢麻豆传| 高清中文字幕在线a片| 国产偷窥熟妇高潮呻吟| 国产山东48老熟女嗷嗷叫白浆| 色欲AⅤ亚洲情无码AV| 777国产偷窥盗摄精品品在线 | 欧美性猛交aaaa片黑人| 成人做爰www网站视频| 广东少妇大战黑人34厘米视频| 永久免费的网站在线观看| 国产精品a∨一区二区三区| 精品久久久久久无码人妻蜜桃| 久久蜜桃精品一区二区三区| 男男吹潮视频chinese| 17岁日本免费完整版观看| 精品久久久久久久无码人妻热| 亚洲香蕉成人av网站在线观看| 99精产国品一二三产区区 | 性做久久久久久| 毛片免费全部无码播放| 久久久国产精品VA麻豆| 最近免费中文字幕大全免费版视频| 精品熟人妻一区二区三区四区不卡| 久久精品国产99国产电影网| 久久久无码精品亚洲日韩精东传媒 | 中文无码一区二区三区在线观看|