精品国品一二三产品区别在线观看,三人性FREE欧美,亚洲精品国产精品乱码不卡√,精品久久久久久成人av

當前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  支原體檢測試劑盒qPCR Kit (經(jīng)典法)的操作步驟

支原體檢測試劑盒qPCR Kit (經(jīng)典法)的操作步驟

更新時間:2022-11-23  |  點擊率:1010

支原體qPCR法介紹:

熒光定量PCR法(qPCR):是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上,將『針對支原體特異性保守序列的探針』做熒光標記,使PCR擴增后的產(chǎn)物帶有熒光,利用熒光信號的變化和配套軟件,進行DNA擴增反應(yīng)的實時監(jiān)測,簡稱qPCR。

優(yōu)點:

①靈敏度高、特異性強。

②時間短,2-3小時出結(jié)果

③檢測結(jié)果可定量

④操作簡便

缺點:

①對于已做支原體滅活處理的樣品,由于支原體DNA仍舊存在其中,PCR結(jié)果會出現(xiàn)假陽性。(可用培養(yǎng)法做補充驗證)

②不同廠家生產(chǎn)的試劑盒質(zhì)量差異巨大(由于引物及內(nèi)在設(shè)計不同),需謹慎選擇,盡量在專業(yè)人員推薦指導下使用。

操作步驟

第1步:樣本處理

a.細胞培養(yǎng)上清

b. 生物藥或需遵循藥典的樣本

說明:①樣品基質(zhì)可能會影響檢測的靈敏度。收集和篩選更高的樣品量可提高測定靈敏度。

②細胞培養(yǎng)物樣本含豐富的DNA酶,在低溫下也能降解支原DNA,影響檢測靈敏度。

建議:樣本做DNA抽提處理,實現(xiàn)最高靈敏度。

推薦:德國MB公司生產(chǎn)的專用支原體DNA提取試劑盒

Venor® Gem Sample Preparation Kit

該DNA抽提試劑盒已經(jīng)過廣泛驗證。

第2步:試劑制備

a.凍干粉溶解

b. 反應(yīng)體系制備

b1) 樣品為細胞上清篩查——反應(yīng)體系制備

b2) 樣品為生物藥——反應(yīng)體系制備

第3步:啟動熒光定量PCR儀

第4步:結(jié)果判別

FAM通道:檢測支原體熒光信號。HEX通道:檢測內(nèi)控對照熒光信號。

支原體DNA和內(nèi)控DNA存在信號的競爭性抑制。

支原體DNA越多,F(xiàn)AM通道信號越高,檢測內(nèi)控對照的HEX通道信號越低。

定量需基于Ct值和DNA標準曲線。

Ct<40為陽性結(jié)果。Ct≥40為陰性結(jié)果


无码人妻丰满熟妇区免费| 国产精品免费一区二区三区视频 | 亚洲国产在线观看| 男女男精品免费视频网站| 久久久精品妓女影院妓女网| 亚洲av中文无码乱人伦在线视色| 国产片+人+综合| 欧美老妇大p毛茸茸| 中文字幕免费视频不卡| 日本免费一区二区| 国产精品福利一区二区| 久久偷看各类wc女厕嘘嘘| 真人床震高潮全部视频免费| 欧洲美女黑人粗性暴交视频| 午夜无码一区二区三区在线观看| 国产一精品一av一免费爽爽| 领导征服下属新婚人妻| 两个人在线观看视频| 亚洲精品乱码久久久久久v| 国产精品久久无码一区| 丰满欧美大爆乳性猛交| 三上悠亚av作品在线观看| 无码人妻精品一区二区三区在线| 国产欧美熟妇另类久久久| 精品国产污污免费网站AⅤ| 亚洲精品久久久口爆吞精| 亚洲精品无码午夜福利中文字幕 | 亚洲精品久久久久久| 天美传媒免费观看一二三在线| 国产精品美女久久久久久久| 熟女人妻一区二区三区免费看| 免费a级毛片高清视频不卡| 亚洲国产精品无码久久sm| 色精阁久艾草国产WWW| 国产妇女馒头高清泬20P多| 日本进口dvd播放器多少钱一部| 国产午夜精品一区二区三区| 日本理伦片午夜理伦片| 中文字幕aⅴ人妻一区二区| A级毛片高清免费视频在线播放| 冠希实干阿娇13分钟视频在线|