精品国品一二三产品区别在线观看,三人性FREE欧美,亚洲精品国产精品乱码不卡√,精品久久久久久成人av

當(dāng)前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  細胞培養(yǎng)中的污染監(jiān)控與檢測——支原體

細胞培養(yǎng)中的污染監(jiān)控與檢測——支原體

更新時間:2022-03-10  |  點擊率:723

之前的文章中,我們說到如果在養(yǎng)細胞的過程中,如何判斷細胞是否被細菌、真菌感染,以及如何祛除細菌污染。


還沒看的戳戳下面的鏈接直達


今天我們來討論一下,細胞培養(yǎng)過程中的,更難處理的支原體污染。


三、支原體污染


支原體概述:

支原體(mycoplasma)是一類沒有細胞壁、高度多形性、能通過濾菌器、可用人工培養(yǎng)基培養(yǎng)增殖的最小原核細胞型微生物,大小為0.1~0.3微米。由于能形成絲狀與分枝形狀,故稱為支原體。


在細胞培養(yǎng)過程中,顯微鏡很難捕捉到它們的身影,與細胞競爭營養(yǎng),影響細胞生長,最終導(dǎo)致實驗出現(xiàn)偏差。


支原體污染癥狀:

在往期文章中,有介紹過如何鑒定支原體污染的,戳戳下方鏈接一起回顧

DIY判斷細胞的支原體污染


總結(jié)一下:


支原體污染鑒定:

推薦使用穩(wěn)定可靠的支原體檢測試劑盒,這里以經(jīng)典法試劑盒:Venor®Gem qEP(貨號:11-9025/11-9100/11-9250)為例:


1、樣品制備:

①濃縮:當(dāng)細胞長至90%時,即可收集上清開始檢測,可對樣品進行適當(dāng)濃縮。

注:濃縮僅適用于支原體的完整性,避免濃縮前支原體被破壞(如熱滅活)。


②穩(wěn)定:細胞培養(yǎng)樣品可能含有豐富的DNA酶,在低溫下也能降解支原體DNA。因而推薦進行樣品穩(wěn)定化處理。如果立即進行DNA抽提,則忽略這一步。


③DNA 抽提:大量證據(jù)表明,DNA抽提可實現(xiàn)最高的靈敏度。DNA抽提有多種方法,但應(yīng)適合支原體基因組。


我們推薦:

Venor®GeM Sample Preparation kits (貨號56-1010/-1050/-1200)適合手動DNA抽提。


這些DNA抽提試劑盒已經(jīng)過大量驗證,具體流程參見試劑盒說明書。另外Venor®GeM qEP kit包含的內(nèi)控DNA對照,也用于驗證DNA抽提步驟(內(nèi)控原理:已知濃度的細胞,包含內(nèi)部控制DNA序列,該序列不和現(xiàn)有的任何有機體序列同源,對檢測的DNA樣品干擾極小。在DNA提取前,將該內(nèi)控細胞和樣品一起加入細胞裂解液中,被一起提取出來。和靶點樣品一起進行熒光定量PCR實驗,內(nèi)控DNA序列的成功擴增提示靶點DNA的提取成功)。


二、試劑制備與PCR


注:具體參數(shù)設(shè)置可點擊閱讀原文,登錄締一*網(wǎng)站進行查詢


另外,下列儀器已經(jīng)通過PCR反應(yīng)驗證:


3、結(jié)果分析

FAM通道檢測支原體熒光信號。依據(jù)DNA標(biāo)準(zhǔn)曲線和Ct值定量。具體步驟需參考具體qPCR 儀及軟件的功能。我們推薦對包括對照在內(nèi)的每個樣品的擴增曲線進行評估。

Ct<40為陽性結(jié)果。Ct≥40為陰性結(jié)果。支原體DNA和內(nèi)控DNA存在信號的競爭性抑制。支原體DNA越多,F(xiàn)AM通道信號越高,檢測內(nèi)控對照的HEX通道信號越低。


亚洲成av人片在线观看天堂无码 | 亚洲午夜精品久久久久久浪潮| 亚洲VA中文字幕无码久久不卡 | 国产777涩在线 | 美洲| WWW性久久久COM| 欧美丰满熟妇BBBBBB百度| 国产sm鞭打折磨调教视频| 久久久国产精品消防器材| 成人免费看吃奶视频网站| 亚洲 自拍 另类 欧美 综合| 欧美熟妇XXXXX欧美老妇不卡| 国产AV熟女一区二区三区| 中文字幕乱码无码人妻系列蜜桃| 18成禁人10000视频免费| 久久99国产精品成人| 97精品国产一区二区三区| 亚洲av无码国产精品夜色午夜 | 国内少妇人妻丰满AV| 18禁免费无码无遮挡不卡网站| 国精产品一区二区三区公司| 好爽好黄的视频| 天堂无码人妻精品一区二区三区| 人妻AV一区二区三区精品| 欧美又粗又硬又大免费视频Q| 欧美一区二区三区成人片在线| 亚洲av成人无码久久精品老人| 人妻办公室出轨上司hd院线| 亚洲av乱码一区二区三区香蕉| 国产精品h片在线播放| 国产98色在线 | 国产| 久久精品国产亚洲欧美| 亚洲 另类 日韩 制服 无码| 国产无套内射普通话对白| 日本人69XXX| 国产精品久久久久9999 | 国产精品亚洲成在人线| 亚洲中文字幕无码av永久| 国产成人无码视频一区二区三区 | 亚洲第一aaaaa片| 日本肉体裸交xxxxbbbb| 被公侵犯中文字幕无码|