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論動物細胞的灌注培養(yǎng)

更新時間:2020-11-20  |  點擊率:708

動物細胞的培養(yǎng)技術(shù)自上世紀(jì)初出現(xiàn)以來,經(jīng)歷了一個多世紀(jì)的發(fā)展,獲得了很大的進步。不僅建立了許多細胞系和培養(yǎng)了許多類型的原代細胞,而且開發(fā)了人工合成培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)基,并且出現(xiàn)了細胞工程,哺乳動物細胞的大規(guī)模培養(yǎng)獲得了工業(yè)化的應(yīng)用,用于生產(chǎn)重組蛋白、單克隆抗體等生物藥、載體病毒、病毒性疫苗等。開發(fā)了微載體、中空纖維管和生物反應(yīng)器等,并且實現(xiàn)了一種不同以往的培養(yǎng)方式——灌注培養(yǎng)。目前,灌注培養(yǎng)已成為高產(chǎn)率培養(yǎng)細胞的主要方法。

灌注培養(yǎng)有四個特點:

一是能及時地補充營養(yǎng)物質(zhì)和排出代謝產(chǎn)物,有利于細胞的擴增,實現(xiàn)高密度培養(yǎng);

二是提供穩(wěn)定的環(huán)境,有利于細胞的持續(xù)增殖;

三是可實現(xiàn)梯度培養(yǎng),如梯度培養(yǎng)箱的腔面和基底面分別用不同的培養(yǎng)液灌注,更接近體內(nèi)環(huán)境,可用于體外三維組織工程的構(gòu)建。

四是灌注培養(yǎng)檢測廢液中葡萄糖和乳酸濃度,進而更清楚當(dāng)前細胞培養(yǎng)微環(huán)境情況。

灌注培養(yǎng)可用含血清的培養(yǎng)基。但無血清培養(yǎng)基已成為發(fā)展的趨勢。只是無血清開發(fā)成本高,應(yīng)用范圍窄,尚未全部替代含血清培養(yǎng)基。 

目前市面上的血清品牌很多,可重點關(guān)注締一生物提供的進口Ausbian精制新生牛血清。一般新生牛血清應(yīng)具有如下特點:

1. 內(nèi)毒素低,內(nèi)毒素選取小于3Eu/ml,可以使細胞更健康。對于客戶做實驗更加順利。如果選取內(nèi)毒素較高的血清,細胞一直泡在毒液里,短期內(nèi)試不出結(jié)果,用不健康的細胞做實驗,對實驗結(jié)果造成嚴(yán)重影響。

2. 原裝試用,保證后續(xù)供貨為同一個批次。客戶試用好后對于購買的血清更加有把握,同一批次已經(jīng)試過了,也保證了實驗更加順利。
3. 同一個批次數(shù)量多,2000瓶,可以長期不用換批次。保證了實驗更加順利的同時,節(jié)省了試用的時間和成本。
4. 多個批次可以選擇。不限一次試用,可以適應(yīng)不同課題。以保障實驗順利。

5. 多個課題組,客戶在使用。相當(dāng)于多個角度測試該批次血清,說明血清對于細胞實驗的支持,保證了實驗順利。

符合要求的血清可用于細胞培養(yǎng)。

 

參考文獻

唐光霞, 陳建蘇. 灌注動物細胞培養(yǎng)及其在組織工程中的應(yīng)用進展.眼科新進展.2010,30(5):486-491

 

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