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科研人員,在哪幾種情況下對應(yīng)對胎牛血清內(nèi)毒素格外留意

更新時間:2020-11-02  |  點擊率:730

胎牛血清主要的作用就是提供基本的營養(yǎng)物質(zhì)以及提供接觸和伸展因子,有效避免細胞貼壁受到機械的損傷。本文締一生物為您分析科研人員,在哪幾種情況下對應(yīng)對胎牛血清內(nèi)毒素格外留意。

 

1.養(yǎng)干細胞時,干細胞對內(nèi)毒素非常敏感,如果血清中內(nèi)毒素≥3EU/ml時,干細胞很容易死亡。很多使用者,在血清在試用前,就通過提早審核該批次《檢測報告》,以決定是否入圍進行試用。

2.養(yǎng)免疫細胞時,過高的內(nèi)毒素可誘導免疫細胞釋放炎癥因子,抑制小鼠紅細胞集落的形成等。

3.基因敲除相關(guān)的細胞實驗,培養(yǎng)的細胞要盡可能保持其原始狀態(tài),任何引導細胞衰老或凋亡的試劑,都會讓后續(xù)的實驗結(jié)果“失之毫厘,謬以千里”。在準備血清和其他試劑時,選擇極低的內(nèi)毒素(hao≤1EU/ml),對實驗至關(guān)重要;

4.原代培養(yǎng)、雜交瘤融合、細胞轉(zhuǎn)染,或者肝細胞、神經(jīng)細胞、內(nèi)皮等難養(yǎng)細胞的擴增,這些都需要挑選好的血清給細胞以有力支持。因此,挑選更低的內(nèi)毒素,是保證實驗順利的第yi步。

5.實驗室有些細胞,需要長期培養(yǎng)、長期凍存,或者經(jīng)常復蘇、經(jīng)常培養(yǎng)的,血清會經(jīng)常或長時間作用于細胞。為保證細胞的健康,都應(yīng)該選用更低內(nèi)毒素的血清,以避免內(nèi)毒素長久對細胞的毒性影響。

 

總之,血清中內(nèi)毒素含量過高,更容易導致細胞“亞健康”,造成數(shù)據(jù)不準,或細胞狀態(tài)不良、老化、甚至死亡,導致試驗中斷失敗。血清中的內(nèi)毒素越低越好。

 

全qiu細胞培養(yǎng)學會均依據(jù)內(nèi)毒素對血清的品質(zhì)進行分級和命名。

內(nèi)毒素含量越低的血清,級別就越高,以胎牛血清為例:

當血清中內(nèi)毒素含量≤10EU/ml時,此血清為特級胎牛血清;

當血清中內(nèi)毒素含量﹥10EU/ml,≤ 25EU/ml時,此血清為優(yōu)級胎牛血清;

當血清中內(nèi)毒素含量≥ 25EU/ml時,此血清為標準級胎牛血清;

目前,由于同一廠家,不同批次的血清,內(nèi)毒素數(shù)值也可能有較大差異,因此很多血清廠家在名稱上已不注明級別。但使用者仍可通過檢測報告,自行甄別挑選。)

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